登革热IgG检测试剂盒

Panbio Dengue IgG Capture ELISA

产品目录号01PE10

预期用途

Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于推断性定性检测登革热病毒（1-4血清型）继发性感染患者的IgG抗体升高，辅助临床实验室诊断出现登革热病毒感染临床症状的患者，而且应该与Panbio Dengue IgM Capture ELISA和Dengue Early ELISA联用。Dengue Early ELISA也可检测原发性登革热病毒感染。PanbioDengue IgG Capture ELISA早可在疾病发作后3天检测到提示继发性登革热感染的高IgG水平。然而，准确诊断继发性感染的峰值检测窗口是在疾病发作后6-15天。阳性结果是推断出来的，经过病毒分离培养、配对血清分析、组织化学抗原检测或病毒核酸。检测来确认登革热病毒感染。

概述

登革热病毒是黄病毒属，主要分布于热带和亚热带地区。世界上一半以上的人口居住于具有登革热潜在传播风险的地区，登革热是导致人类发病和死亡严峻的虫媒病毒疾病1。登革热病毒有4种不同但抗原相

关的血清型，通过雌蚊（主要是埃及伊蚊、白纹伊蚊传播和波利尼西亚斑蚊）传播。

登革热病毒感染的临床表现各不相同，从亚临床表现到致命。依据严重程度，该疾病被分为以下等级：非特异性发热疾病，典型登革热，登革出血热（DHF）（1级和2级），和登革休克综合征（DSS）（3级和4级）

1。典型登革热的特征是突然发热并至少伴随以下2种症状：头痛，眼眶后疼痛，肌痛，关节痛，皮疹，出血表现，和白血球减少症

2。双相发热病程常见失眠和厌食，失去味觉或口苦。DHF和DSS是严重的潜在致命性并发症，通常与感染二种血清型有关

3。在地方性流行登革热感染的国家，大部分成年患者会出现继发性登革热感染4。利用ELISA方法检测登革热病毒的IgG抗体特异性升高是鉴别继发性登革热感染非常重要的诊断方法。继发性感染患者并发症的发生几率较高5,6。传统上，血凝抑制试验（HAI）滴度被用于划分原发性或继发性感染。当前的界定方法是采用及时分离至少7天的配对血清标本检测，急性标本的HAI滴度> 1:1280被认为患者感染了继发性黄病毒7。

Panbio Dengue IgG Capture ELISA是除HAI检测之外另一种可对继发性登革热感染的血清学进行诊断的方法。

如下所示，继发性登革热病毒感染的特征表现为高IgG水平，同时可能伴随IgM水平升高8。Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于检测登革热感染的IgG抗体水平相对于阈值特异性升高。该试验不用于检测既往感染引起的低水平IgG抗体，这种情况通常见于地方性流行区的较多人群。因此，高IgG水平（> 22 Panbio单位）提示继发性登革热病毒感染。

Panbio Dengue IgG Capture ELISA

产品目录号01PE10

预期用途

Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于推断性定性检测登革热病毒（1-4血清型）继发性感染患者的IgG抗体升高，辅助临床实验室诊断出现登革热病毒感染临床症状的患者，而且应该与Panbio Dengue IgM Capture ELISA和Dengue Early ELISA联用。Dengue Early ELISA也可检测原发性登革热病毒感染。PanbioDengue IgG Capture ELISA早可在疾病发作后3天检测到提示继发性登革热感染的高IgG水平。然而，准确诊断继发性感染的峰值检测窗口是在疾病发作后6-15天。阳性结果是推断出来的，经过病毒分离培养、配对血清分析、组织化学抗原检测或病毒核酸。检测来确认登革热病毒感染。

概述

登革热病毒是黄病毒属，主要分布于热带和亚热带地区。世界上一半以上的人口居住于具有登革热潜在传播风险的地区，登革热是导致人类发病和死亡严峻的虫媒病毒疾病1。登革热病毒有4种不同但抗原相

关的血清型，通过雌蚊（主要是埃及伊蚊、白纹伊蚊传播和波利尼西亚斑蚊）传播。

登革热病毒感染的临床表现各不相同，从亚临床表现到致命。依据严重程度，该疾病被分为以下等级：非特异性发热疾病，典型登革热，登革出血热（DHF）（1级和2级），和登革休克综合征（DSS）（3级

和4级）1。典型登革热的特征是突然发热并至少伴随以下2种症状：头痛，眼眶后疼痛，肌痛，关节痛，皮疹，出血表现，和白血球减少症2。双相发热病程常见失眠和厌食，失去味觉或口苦。DHF和DSS是严重的潜在致命性并发症，通常与感染二种血清型有关3。

在地方性流行登革热感染的国家，大部分成年患者会出现继发性登革热感染4。利用ELISA方法检测登革热病毒的IgG抗体特异性升高是鉴别继发性登革热感染非常重要的诊断方法。继发性感染患者并发症的发

生几率较高5,6。传统上，血凝抑制试验（HAI）滴度被用于划分原发性或继发性感染。当前的界定方法是采用及时分离至少7天的配对血清标本检测，急性标本的HAI滴度> 1:1280被认为患者感染了继发性黄病毒7。

Panbio Dengue IgG Capture ELISA是除HAI检测之外另一种可对继发性登革热感染的血清学进行诊断的方法。

如下所示，继发性登革热病毒感染的特征表现为高IgG水平，同时可能伴随IgM水平升高8。Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于检测登革热感染的IgG抗体水平相对于阈值特异性升高。该试验不用于检测既往感染引起的低水平IgG抗体，这种情况通常见于地方性流行区的较多人群。因此，高IgG水平（> 22 Panbio单位）提示继发性登革热病毒感染。

检测原理

血清中存在的登革热病毒IgG抗体，与微孔测试条（测定板）上聚苯。乙烯表面包被的抗人IgG抗体结合。用抗原稀释剂将浓缩的重组登革热1-4型抗原溶液稀释到正确的工作容积。用昆虫细胞表达系统产生抗原，用特异性单克隆抗体纯化抗原。在稀释后的抗原中添加等体积的辣根过氧化物酶（HRP）标记单克隆抗体（MAb），形成抗原MAb复合物。清洗测定板上的剩余血清，将抗原MAb复合物添加到测定板中。然后这些抗原MAb复合物与血清登革热特异性IgG抗体结合。在培养完成后清洗微孔，再添加无色的底物系统-四甲基联苯胺/过氧化氢（TMB显色液）。底物被HRP（如存在）水解后，显色液变蓝。用酸终止反应后，TMB变黄。显色表示测试样本中存在抗登革热IgG抗体。

提供的材料

抗人IgG包被微孔-（测定板）

（12x8孔）。即用型。未使用的微孔应该立即重新密封并储存于干燥环境中。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

登革热1-4型抗原（重组）-1瓶，无色瓶盖，包含150μL（红色）浓缩的1型、2型、3型和4型登革热病毒抗原。未使用的稀释抗原丢弃。浓缩抗原在有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

清洗缓冲液（20倍）-1瓶，60mL 20倍浓缩磷酸盐缓冲盐水（pH 7.2–7.6），含吐温20和防腐剂（0.1% Proclin™）。低温可能结晶。若去除结晶，可在37℃孵育液体至澄清。混合均匀。用19体积的蒸馏水稀释1体积的清洗缓冲液。稀释后的缓冲液可在2-25℃储存一周。

样本稀释剂–2瓶，50 mL（粉色）。即用型。Tris缓冲生理盐水（pH 7.2–7.6），含防腐剂（0.1%Proclin™）和添加剂。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

抗原稀释剂–1瓶，50mL（无色）。即用型。磷酸盐缓冲液，含防腐剂（0.1% Proclin™和0.005%庆大霉素）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

HRP标记单克隆抗体示踪剂–1瓶，7mL（绿色）。即用型。辣根过氧化物酶（HRP）标记单克隆抗体示踪剂，含防腐剂（0.1% Proclin™）和蛋白稳定剂。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

TMB显色液（TMB）-1瓶，15mL。即用型。3,3’,5,5'-四甲基联苯胺和过氧化氢的混合物，存放于枸橼酸盐缓冲液中（pH 3.5–3.8）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

反应控制品–1瓶，红色瓶盖，200μL人血清（含0.1%叠氮。化钠和0.005%硫.酸庆大霉素）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

校准品–1瓶，黄色瓶盖，400μL人血清（含0.1%叠氮。化钠和0.005%硫。酸庆大霉素）。有效期内储

存于2-8℃可保持稳定。

阴性质控品–1瓶，绿色瓶盖，200μL人血清（含0.1%叠氮。化钠和0.005%硫。酸庆大霉素）。有效期内储存于2-8℃可保持稳定。

11.终止液–1瓶，红色瓶盖，15mL。即用型。1M磷酸。有效期内储存于2-25℃可保持稳定。Proclin™ 300是Rohm和Haas公司的注册商标。